凱氏定氮法是由丹麥化學家凱道爾于1883年率先提出,由于設備要求簡單,自提出后便成為蛋白質測定的經典方法,廣泛運用于蛋白質檢測中。凱氏定氮法通過硫酸高溫消化,只能將有機氮轉化為無機銨,而對于硝態氮(如硝酸鹽、亞硝酸鹽)則不能轉化。因此凱氏定氮法適用于不含硝態氮的食品、農產品、化妝品、醫藥等。本文為大家詳細介紹凱氏定氮法原理是什么以及凱氏定氮法的優缺點。
1、凱氏定氮法原理
凱氏定氮法是測定化合物或混合物中總氮量的一種方法。在有催化劑的條件下,用濃硫酸消化樣品將有機氮都轉變成無機銨鹽,然后在堿性條件下將銨鹽轉化為氨,隨水蒸氣蒸餾出來并為過量的硼酸液吸收,再以標準鹽酸滴定,就可計算出樣品中的氮量。由于蛋白質含氮量比較恒定,可由其氮量計算蛋白質含量,蛋白質含量=含氮量*6.25。
2、凱氏定氮法的優缺點
優點:
①可用于所有食品的蛋白質分析中;
②操作相對比較簡單;
③實驗費用較低;
④結果準確,是一種測定蛋白質的經典方法;
⑤用改進方法(微量凱氏定氮法)可測定樣品中微量的蛋白質。
缺點:
①最終測定的是總有機氮,而不只是蛋白質氮;
②實驗時間太長(至少需要2h才能完成);
③精度差,精度低于雙縮脲法;
④所用試劑有腐蝕性。
其中采用凱氏定氮法測定蛋白質含量的儀器就是凱氏定氮儀。